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体外
AZD1775增强了5-FU对p53缺陷型人结肠癌细胞的细胞毒作用。 AZD1775抑制细胞中CDC2 Y15磷酸化，消除由5-FU处理诱导的DNA损伤检查点，并导致通过诱导组蛋白H3磷酸化确定的有丝分裂的过早进入。 AZD1775消除了p53缺陷细胞中辐射诱导的G2阻滞，但p53野生型细胞系没有。 与p53缺陷肿瘤中的吉西他滨治疗相比，吉西他滨与AZD1775的组合产生强大的抗肿瘤活性并显着增强肿瘤消退反应（4.01倍）。
体内
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在体内，AZD1775以可耐受的剂量增强5-FU或其前药卡培他滨的抗肿瘤功效。 AZD1775（60mg / kg每日两次，p.o。）增强H1299异种移植肿瘤对分次放疗的反应。 与GEM处理的小鼠相比，AZD1775（30mg / kg.p.o.）使PANC198，PANC215和PANC185中的肿瘤生长退化
AZD1775的细胞分析[2]
使用含有50 mM HEPES（pH 7.9），0.4 mol / L NaCl和1 mM EDTA的裂解液从细胞沉淀中提取总蛋白，并用10μL/ mL磷酸酶抑制剂混合物1,10μL/ mL磷酸酶抑制剂混合物强化 2,10μL/ mL蛋白酶抑制剂和1％NP-40。 通过Bio-Rad蛋白质测定法测定裂解物的蛋白质浓度。 通过12％SDS-PAGE分离等量的蛋白质并转移至Immobilon膜。 膜上的非特异性结合位点在含有0.1％吐温（TBS-T）的Tris（20mM） – 缓冲盐水（150mM，pH7.4）中的5％脱脂奶粉中被封闭。 通过将膜在5％脱脂奶粉中的第一抗体中的膜在4℃温育过夜，然后在合适的过氧化物酶缀合的第二抗体中孵育45分钟来检测蛋白质信号。 然后通过在Typhoon 9400扫描仪上使用ECL加Western Blotting Detection Reagents的增强化学发光来显影膜。
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